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QIAGEN Plasmid Maxi Kit (25)，Qiagen质粒大量提取试剂盒，25次

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货号 12163
品牌 Qiagen/凯杰
CAS号
规格/包装 25次
售卖单位 25次
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QIAGEN Plasmid Maxi Kit (25)

25 QIAGEN-tip 500, Reagents, Buffers

12163

转染效率与质粒纯化方法。

采用不同方法制备pRSVcat DNA，通过脂质体介导的转染将其导入指定的细胞系内，40小时后测定CAT表达水平，确定转染效率。每个柱形代表4个独立的转录的平均值（2个质粒制备物分别转染2次）。使用QIAGEN Plasmid Kit可获得最高的转染效率。

如下图：

QIAGEN Plasmid Kit实验流程。

将中性细菌裂解物直接置于QIAfilter Cartridge内孵育，数秒内即可过滤澄清。然后将澄清的裂解物上样至阴离子交换纯化柱，在适当的低盐和pH条件下，质粒DNA会选择性地结合上去。利用中盐浓度的洗涤液去除RNA、蛋白质、代谢物及其他低分子量杂质，使用高盐缓冲液洗脱超纯的质粒DNA。利用异丙醇沉淀对DNA进行浓缩并脱盐，并通过离心收集。

如下图：

性能

QIAGEN Plasmid Kit利用重力流QIAGEN阴离子交换柱技术高效纯化质粒DNA。产量可达10 mg（Giga）、2.5 mg（Mega）、500 µg（Maxi）、或100 µg（Midi）高拷贝质粒DNA（培养体积取决于质粒拷贝数、插入片段大小、宿主菌株和培养基。）QIAGEN Plasmid Kits纯化的质粒DNA适合多种应用，如：转染（参见Transfection efficiency versus plasmid purification method）、克隆和体外转录。

原理

QIAGEN-tips内独特的阴离子交换树脂专为纯化核酸设计。它独特的分离特性，使纯化的DNA的纯度相当于连续2次CsCl梯度离心得到的DNA纯度。预装的QIAGEN-tips利用重力流原理工作，缩短了纯化质粒的手动操作时间。整套QIAGEN质粒纯化体系避免苯酚、氯仿、溴化乙锭和CsCl等有毒物质，减小对使用者和环境的危害。

操作流程

使用QIAGEN Plasmid Kits，细菌裂解物通过离心澄清。澄清后的裂解物上样到阴离子交换柱，质粒DNA在适当的低盐条件和pH条件下与树脂进行选择性结合。RNA、蛋白质、代谢产物和和其它低分子量杂质用中盐洗涤液去除，用高盐缓冲液洗脱纯质粒DNA（参见QIAGEN Plasmid Kit procedures）。得到的DNA用异丙醇沉淀浓缩和脱盐后，离心收集。

应用

QIAGEN Plasmid Kits纯化质粒DNA适合多种应用，如：

转染
克隆
PCR
体外转录

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